USO PRETENDIDO
O Passo Forte^®O teste PROM é um teste imunocromatográfico interpretado visualmente destinado a ser usado para a detecção qualitativa de fibronectina fetal em secreções cervicovaginais.A presença de fibronectina fetal nas secreções cervicovaginais entre 22 semanas, 0 dias e 34 semanas, 6 dias de gestação éassociada ao risco elevado de parto prematuro.

INTRODUÇÃO
O parto prematuro, definido pelo American College of Obstetricians and Gynecologists como parto antes da 37ª semana de gestação, é responsável pela maioria da morbidade e mortalidade perinatal não cromossômica.Os sintomas de ameaça de parto prematuro incluem contrações uterinas, alteração do corrimento vaginal, sangramento vaginal, dor nas costas, desconforto abdominal, pressão pélvica e cólicas.As modalidades de diagnóstico para identificação da ameaça de parto prematuro incluem o monitoramento da atividade uterina e a realização de um exame digital do colo do útero, que permite estimar as dimensões do colo do útero.Esses métodos têm se mostrado limitados, pois a dilatação cervical mínima (< 3 centímetros) e a atividade uterina ocorrem normalmente e não são necessariamente diagnósticas de parto prematuro iminente.Embora vários marcadores bioquímicos séricos tenham sido avaliados, nenhum foi amplamente aceito para uso clínico prático.

A fibronectina fetal (fFN), uma isoforma da fibronectina, é uma glicoproteína adesiva complexa com um peso molecular de aproximadamente 500.000 daltons.Matsuura e colaboradores descreveram um anticorpo monoclonal chamado FDC-6, que reconhece especificamente III-CS, a região que define a isoforma fetal da fibronectina.Estudos imuno-histoquímicos de placentas mostraram que fFN éconfinado à matriz extracelular da região que define a junçãodas unidades maternas e fetais dentro do útero.

A fibronectina fetal pode ser detectada nas secreções cervicovaginais de mulheres durante a gravidez por meio de um imunoensaio baseado em anticorpos monoclonais.A fibronectina fetal está elevada nas secreções cervicovaginais durante o início da gravidez, mas diminui de 22 a 35 semanas em gestações normais.O significado de sua presença na vagina durante as primeiras semanas de gravidez não é compreendido.No entanto, pode simplesmente refletir o crescimento normal da população de trofoblastos extravilosos e da placenta.A detecção de fFN em secreções cervicovaginais entre 22 semanas, 0 dias e 34 semanas, 6 dias de gestação está associada ao parto prematuro em gestantes sintomáticas e entre 22 semanas, 0 dias e 30 semanas, 6 dias em gestantes assintomáticas.

PRINCÍPIO
O Passo Forte^®O teste fFN usa tecnologia de fluxo capilar imunocromatográfico colorido.O procedimento de teste requer a solubilização de fFN de um swab vaginal misturando o swab em Sample Buffer.Em seguida, o tampão de amostra misturado é adicionado ao poço de amostra do cassete de teste e a mistura migra ao longo da superfície da membrana.Se fFN estiver presente na amostra, ele formará um complexo com o anticorpo anti-fFN primário conjugado com partículas coloridas.O complexo será então ligado por um segundo anticorpo anti-fFN revestido na membrana de nitrocelulose.O aparecimento de uma linha de teste visível junto com a linha de controle indicará um resultado positivo.

COMPONENTES DO KIT

MATERIAIS NECESSÁRIOS MAS NÃO FORNECIDOS

PRECAUÇÕES
■ Apenas para uso profissional em diagnóstico in vitro.
■ Não use após a data de validade indicada na embalagem.Não use o teste se a bolsa de alumínio estiver danificada.Não reutilize os testes.
■ Este kit contém produtos de origem animal.O conhecimento certificado da origem e/ou estado sanitário dos animais não garante totalmente a ausência de agentes patogénicos transmissíveis.Recomenda-se, portanto, que esses produtos sejam tratados como potencialmente infecciosos e manuseados observando as precauções usuais de segurança (não ingerir ou inalar).
■ Evite a contaminação cruzada de amostras usando um novo recipiente de coleta de amostras para cada amostra obtida.
■ Leia todo o procedimento cuidadosamente antes de realizar qualquer teste.
■ Não coma, beba ou fume na área onde as amostras e kits são manuseados.Manuseie todas as amostras como se contivessem agentes infecciosos.Observe as precauções estabelecidas contra riscos microbiológicos durante todo o procedimento e siga os procedimentos padrão para descarte adequado de amostras.Use roupas de proteção, como batas de laboratório, luvas descartáveis ​​e proteção para os olhos quando as amostras forem analisadas.
■ Não troque ou misture reagentes de lotes diferentes.Não misture as tampas dos frascos de solução.
■ A umidade e a temperatura podem afetar negativamente os resultados.
■ Quando o procedimento do ensaio estiver concluído, descarte os swabs cuidadosamente após autoclavá-los a 121°C por pelo menos 20 minutos.Alternativamente, eles podem ser tratados com hipocloreto de sódio a 0,5% (ou alvejante doméstico) por uma hora antes do descarte.Os materiais de teste usados ​​devem ser descartados de acordo com os regulamentos locais, estaduais e/ou federais.
■ Não use escovas de citologia em pacientes grávidas.

ARMAZENAMENTO E ESTABILIDADE
■ O kit deve ser armazenado a 2-30°C até a data de validade impressa na bolsa selada.
■ O teste deve permanecer na bolsa selada até o uso.
■ Não congele.
■ Deve-se tomar cuidado para proteger os componentes deste kit contra contaminação.Não use se houver evidência de contaminação microbiana ou precipitação.A contaminação biológica de equipamentos de dispensação, recipientes ou reagentes pode levar a resultados falsos.

COLETA E ARMAZENAMENTO DE PECIMEN
■ Use apenas zaragatoas estéreis com ponta de Dacron ou Rayon com hastes de plástico.Recomenda-se a utilização do swab fornecido pelo fabricante do kit (Os swabs não estão contidos neste kit, para informações de pedido, favor contatar o fabricante ou distribuidor local, o número do catálogo é 207000).Swabs de outros fornecedores não foram validados.Cotonetes com pontas de algodão ou hastes de madeira não são recomendados.
■ As secreções cervicovaginais são obtidas do fórnice posterior da vagina.O processo de coleta deve ser suave.A coleta vigorosa ou forçada, comum em culturas microbiológicas, não é necessária.Durante um exame com espéculo, antes de qualquer exame ou manipulação do colo do útero ou do trato vaginal, gire levemente a ponta do aplicador pelo fórnice posterior da vagina por aproximadamente 10 segundos para absorver as secreções cervicovaginais.Tentativas subsequentes de saturar a ponta do aplicador podem invalidar o teste.Remova o aplicador e realize o teste conforme indicado abaixo.
■ Coloque o swab no tubo de extração, se o teste puder ser executado imediatamente.Se o teste imediato não for possível, as amostras do paciente devem ser colocadas em um tubo de transporte seco para armazenamento ou transporte.As zaragatoas podem ser armazenadas durante 24 horas à temperatura ambiente (15-30°C) ou 1 semana a 4°C ou não mais de 6 meses a -20°C.Todas as amostras devem atingir uma temperatura ambiente de 15-30°C antes do teste.

PROCEDIMENTO
Leve os testes, amostras, tampão e/ou controles à temperatura ambiente (15-30°C) antes de usar.
■ Coloque um tubo de extração limpo na área designada da estação de trabalho.Adicione 1 ml de tampão de extração ao tubo de extração.
■ Coloque o swab de amostra no tubo.Misture vigorosamente a solução girando o swab com força contra a lateral do tubo por pelo menos dez vezes (enquanto submerso).Os melhores resultados são obtidos quando a amostra é vigorosamente misturada na solução.
■ Esprema o máximo de líquido possível do swab apertando a lateral do tubo flexível de extração à medida que o swab é removido.Pelo menos 1/2 da solução tampão da amostra deve permanecer no tubo para que ocorra a migração capilar adequada.Coloque a tampa no tubo extraído.
Descarte o swab em um recipiente adequado para resíduos de risco biológico.
■ As amostras extraídas podem permanecer em temperatura ambiente por 60 minutos sem afetar o resultado do teste.
■ Remova o teste de sua bolsa selada e coloque-o em uma superfície limpa e nivelada.Rotule o dispositivo com a identificação do paciente ou do controle.Para obter um melhor resultado, o ensaio deve ser realizado dentro de uma hora.
■ Adicione 3 gotas (aproximadamente 100 µl) de amostra extraída do tubo de extração ao poço de amostra no cassete de teste.
Evite prender bolhas de ar no poço da amostra (S) e não deixe cair nenhuma solução na janela de observação.
À medida que o teste começa a funcionar, você verá a cor se mover pela membrana.
■ Aguarde até que a(s) faixa(s) colorida(s) apareça(m).O resultado deve ser lido em 5 minutos.Não interprete o resultado após 5 minutos.
Descarte os tubos de ensaio e cassetes de teste usados ​​em um recipiente adequado para resíduos de risco biológico.
INTERPRETAÇÃO DOS RESULTADOS