Qual é o melhor método?
—Testes para diagnóstico de infecção por SARS-CoV-2
Para casos confirmados de COVID-19, os sintomas clínicos comuns relatados incluem febre, tosse, mialgia ou fadiga.No entanto, esses sintomas não são características únicas do COVID-19 porque esses sintomas são semelhantes aos de outras doenças infectadas por vírus, como a gripe.Atualmente, o ácido nucleico do vírus PCR em tempo real (rt-PCR), imagens de TC e alguns parâmetros hematológicos são as principais ferramentas para o diagnóstico clínico da infecção.Muitos kits de teste de laboratório foram desenvolvidos e usados no teste de amostras de pacientes para COVID-19 pelo CDC chinês1, CDC dos EUA2e outras empresas privadas.O teste de anticorpos IgG/IgM, um método de teste sorológico, também foi adicionado como critério de diagnóstico na versão atualizada da China das diretrizes de diagnóstico e tratamento para a doença do novo coronavírus (COVID-19), emitida em 3 de março1.O teste de rt-PCR de ácido nucleico do vírus ainda é o método diagnóstico padrão atual para o diagnóstico de COVID-19.
Passo Forte®Novel Coronavlrus (SARS-COV-2)Multiplex Real-Time PCR Kit (detecção de três genes)
No entanto, esses kits de teste de PCR em tempo real, procurando material genético do vírus, por exemplo, em swabs nasais, orais ou anais, sofrem de muitas limitações:
1) Esses testes têm tempos de resposta longos e são de operação complicada;eles geralmente levam em média mais de 2 a 3 horas para gerar resultados.
2) Os testes de PCR exigem laboratórios certificados, equipamentos caros e técnicos treinados para operar.
3) Existem alguns números de falsos negativos para rt-PCR de COVID-19.Pode ser devido à baixa carga viral SARS-CoV-2 na amostra de swab respiratório superior (o novo coronavírus infecta principalmente o trato respiratório inferior, como alvéolos pulmonares) e o teste não pode identificar pessoas que passaram por uma infecção, se recuperaram e limparam o vírus de seus corpos.
Pesquisa de Lirong Zou et al4descobriram que cargas virais mais altas foram detectadas logo após o início dos sintomas, com cargas virais mais altas detectadas no nariz do que na garganta e o padrão de liberação de ácido nucleico viral de pacientes infectados com SARS-CoV-2 se assemelha ao de pacientes com influenza4e parece diferente do observado em pacientes infectados com SARS-CoV-2.
Yang Pan e outros5examinaram amostras seriadas (swabs de garganta, escarro, urina e fezes) de dois pacientes em Pequim e descobriram que as cargas virais em amostras de swab de garganta e escarro atingiram o pico em torno de 5 a 6 dias após o início dos sintomas, as amostras de escarro geralmente mostraram cargas virais mais altas do que amostras de esfregaço da garganta.Nenhum RNA viral foi detectado em amostras de urina ou fezes desses dois pacientes.
O teste de PCR só dá um resultado positivo quando o vírus ainda está presente.Os testes não podem identificar pessoas que passaram por uma infecção, se recuperaram e eliminaram o vírus de seus corpos.Na verdade, apenas cerca de 30%-50% foi positivo para PCR em pacientes com pneumonia por novo coronavírus clinicamente diagnosticada.Muitos novos pacientes com pneumonia por coronavírus não podem ser diagnosticados devido ao teste de ácido nucleico negativo, portanto, não podem obter o tratamento correspondente a tempo.Da primeira à sexta edição das diretrizes, baseando-se apenas no diagnóstico dos resultados dos testes de ácido nucleico, o que causou grandes problemas aos médicos. O primeiro "denunciante", Dr. Li Wenliang, oftalmologista da Wuhan Central Hospital, está morto.Durante sua vida, ele fez três testes de ácido nucleico em caso de febre e tosse, e na última vez obteve resultados positivos de PCR.
Após discussão por especialistas, decidiu-se aumentar os métodos de dosagem sérica como novo critério diagnóstico.Enquanto os testes de anticorpos, também chamados de testes sorológicos, podem confirmar se alguém foi infectado mesmo após o sistema imunológico ter eliminado o vírus que causa o COVID-19.
Teste rápido de anticorpos IgG/IgM para SARS-COV-2 StrongStep®
O teste de anticorpos IgG/IgM ajudará a rastrear de uma maneira muito mais populacional quem teve a infecção, porque muitos casos parecem ser transmitidos de pacientes assintomáticos que não podem ser identificados facilmente.Um casal em Cingapura, o marido testou positivo por PCR, o resultado do teste de PCR de sua esposa foi negativo, mas os resultados do teste de anticorpos mostraram que ela tinha anticorpos, assim como o marido.
Os ensaios sorológicos precisam ser cuidadosamente validados para garantir que reagem de maneira confiável, mas apenas para anticorpos contra o novo vírus.Uma preocupação era que a semelhança entre os vírus que causam a síndrome respiratória aguda grave e o COVID-19 poderia levar à reatividade cruzada.O IgG-IgM desenvolvido por Xue Feng wang6foi considerado apto a ser utilizado como teste point-of-care (POCT), pois pode ser realizado próximo à beira do leito com sangue de punção digital.O kit tem sensibilidade de 88,66% e especificidade de 90,63%.No entanto, ainda houve resultados falsos positivos e falsos negativos.
Na versão atualizada da China das diretrizes de diagnóstico e tratamento para a doença do novo coronavírus (COVID-19)1, os casos confirmados são definidos como casos suspeitos que atendem a qualquer um dos seguintes critérios:
(1) Amostras do trato respiratório, amostras de sangue ou fezes com resultado positivo para ácido nucleico SARS-CoV-2 usando rt-PCR;
(2) O sequenciamento genético de vírus de amostras de amostras do trato respiratório, sangue ou fezes é altamente homólogo ao SARS-CoV-2 conhecido;
(3) O anticorpo IgM específico para o novo coronavírus sérico e o anticorpo IgG foram positivos;
(4) O anticorpo IgG específico para coronavírus do novo soro alterado de negativo para positivo ou anticorpo IgG específico para coronavírus durante o período de recuperação é 4 vezes maior do que durante o período agudo.
Diagnóstico e tratamento da COVID-19
| Diretrizes | Publicado | Critérios de diagnóstico confirmados |
| Versão 7 | 3 de março de 2020 | ❶ PCR ❷ NGS ❸ IgM+IgG |
| Versão 6 | 18 de fevereiro de 2020 | ❶ PCR ❷ NGS |
Referência
1. Diretrizes para diagnóstico e tratamento de pneumonia por novo coronavírus (versão de teste 7, Comissão Nacional de Saúde da República Popular da China, emitida em 3 de março de 2020)
http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7652m/202003/a31191442e29474b98bfed5579d5af95.shtml
2. Pesquisa usa apenas protocolo RT-PCR em tempo real para identificação de 2019-nCoV
https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/lab/rt-pcr-detection-instructions.html
3. Cingapura reivindica o primeiro uso de teste de anticorpos para rastrear infecções por coronavírus
https://www.sciencemag.org/news/2020/02/singapore-claims-first-use-antibody-test-track-coronavirus-infections
4. Carga viral do SARS-CoV-2 em amostras respiratórias superiores de pacientes infectados 19 de fevereiro de 2020 DOI: 10.1056/NEJMc2001737
5. Cargas virais de SARS-CoV-2 em amostras clínicas Lancet Infect Dis 2020 Publicado on-line em 24 de fevereiro de 2020 (https://doi.org/10.1016/S1473-3099(20)30113-4)
6. Desenvolvimento e Aplicação Clínica de um Teste Rápido de Anticorpos Combinados IgM-IgG para SARS-CoV-2
Diagnóstico de Infecção XueFeng Wang ORCID ID: 0000-0001-8854-275X
Horário da postagem: 17 de março de 2020
